Undirbúningur sýnishorns:
Sýnishorn: Safnaðu sýnum eins og blóði, vefjum, munnvatni og þvagi eftir tilgangi tilraunarinnar.
DNA útdráttur: Notaðu sérstaka DNA útdráttarbúnað til að draga DNA úr sýninu.
PCR viðbragðsundirbúningur:
Hönnunargrunnur: Hönnun sérstök grunnpör byggð á markröðinni til að magna DNA sniðmáts.
Undirbúðu hvarfblöndu: þar með talið sniðmát DNA, grunnar, biðminni, DNA fjölliðu, DNTPS (deoxynucleoside þrífosföt), mg 2+, etc.
Settu PCR forrit:
Stillingar PCR hljóðfæra: Sláðu inn forstillta PCR hringrásarbreytur, svo sem 95 gráðu forhitun hitastigs, denaturation hitastig (svo sem 95 gráðu), hitastig glæðingar (svo sem 55 gráðu), framlengingarhitastig (svo sem 72 gráðu) og fjöldi lotna.
PCR viðbrögð:
Bættu sýni: Bætið hvarfblöndunni við PCR hvarfgeymi eða flís og hvert sýni hefur venjulega eina viðbrögð vel.
Framkvæmdu PCR: PCR tækið hringir samkvæmt forstilltu forritinu, þar á meðal upphitun, kælingu, glæðingu og framlengingarþrep.
Vörugreining:
Kæling eftir mögnun: Eftir að PCR er lokið er sýnið kælt stuttlega við 4 gráðu.
Rafskautar aðskilnaður: Notaðu rafskaut tækni, svo sem agarósa hlaup rafskaut, til að aðgreina PCR afurðir með mismunandi lengd.
Flúrljómunarskönnun: Flúrljómandi merktir grunnar gefa frá sér ljósi sérstakrar bylgjulengd í magnaða vörunni og PCR tækið les þessi merki og skráir þau.
Gagnavinnsla og túlkun:
Gagnagreiningarhugbúnaður: Notaðu sérhæfðan hugbúnað til að greina flúrperu og reikna styrk eða hlutfallslegan styrk markbrotsins.
Túlkun niðurstaðna: Byggt á PCR ferlinum og grunnlínu, ákvarðaðu hvort PCR sé árangursríkt, hvort markbrotið sé til og hversu mikið það er.
Niðurstaðan og varðveisla:
Skráðu niðurstöðurnar í tilraunaskýrslunni og varðveittu upprunalegu gögnin og sýni á réttan hátt.